*اطلاعیه مهم: bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان اطلاعات قطعی، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.
در مطالعه اخیر ارسال شده به bioRxiv* سرور پیش چاپ، محققان تأثیر یک واکسن سلول دندریتیک تک دوز را بر پاسخ های ایمنی در برابر سندرم حاد تنفسی ویروس کرونا 2 (SARS-CoV-2) ارزیابی کردند.
زمینه
اخیراً، هدف قرار دادن آنتی ژن ها به سلول های دندریتیک (DC) به عنوان یک تکنیک واکسن جذاب تکامل یافته است که کارایی واکسن را افزایش می دهد و امکان کاهش دوز و آنتی ژن را فراهم می کند. هدف قرار دادن واکسن های بالقوه آنتی ژن برای نوع یک DC معمولی Clec9A بیان شده در زیرجمعیت DC (cDC1) در تحقیقات پیش بالینی نویدبخش بوده و پاسخ های ایمنی سلولی و هومورال قوی و پایدار را پس از یک دوز واکسیناسیون ایجاد می کند. Clec9A، یک گیرنده لکتین مانند نوع C، به عنوان گیرنده ای برای تشخیص آسیب عمل می کند. مشخص شد که هدف قرار دادن Clec9A موثرتر از هدف قرار دادن گیرنده های DC است.
در مورد مطالعه
در مطالعه حاضر، محققان پاسخ‌های ایمنی سلولی و هومورال ناشی از یک دوز منفرد سیستمیک ساختار آنتی‌بادی دامنه اتصال گیرنده (RBD) Clec9A-SARS-CoV-2 را در موش بررسی کردند.
این تیم مشخص کرد که 2 میکروگرم از Clec9A-RBD با پلی I:C کمکی قوی‌ترین تیترهای خنثی‌کننده ضد RBD را در بین موش‌های بالغ Balb/c پس از یک دوز واحد ایجاد کرد. یک بررسی طولی از پاسخ هومورال خاص RBD در موش های تلقیح شده با Clec9A-RBD انجام شد. سپس فعالیت خنثی‌کننده سرم‌های ایمونولوژیک Clec9A-RBD در برابر پانلی متشکل از 20 ساربکوویروس، از جمله انواع نگران کننده SARS-CoV-2 (VOCs)، SARS-CoV، و CoV حیوانات متعلق به دودمان پانگولین و خفاش مورد ارزیابی قرار گرفت.
سلول های کمکی فولیکولی T اختصاصی RBD (TFH) و مراکز ژرمینال (GC) سلول های B استخراج شده اندازه گیری شد. سپس تیم پاسخ‌های سلول‌های T اختصاصی RBD را پس از یک دوز واکسیناسیون Clec9A-RBD بررسی کردند. این تیم آزمایش کردند که آیا یک دوز واحد از Clec9A-RBD که به صورت سیستمیک تجویز می شود می تواند پاسخ هومورال و سلولی خاص آنتی ژن را در بافت ریه القا کند یا خیر.
نتایج
نتایج مطالعه نشان داد که واکسیناسیون با دوز آنتی ژن یکسان از SARS-CoV-2 RBD خالص غیر هدفمند با پلی I:C کمکی، پاسخ قابل توجه ایمونوگلوبولین (Ig)-G ضد RBD را برانگیخت. از سوی دیگر، موش‌های واکسینه‌شده با Clec9A-RBD، هفت روز پس از ایمن‌سازی، تیتر آنتی‌بادی قابل‌تشخیصی را به‌دست آوردند که اثربخشی این تکنیک هدف‌گیری را برجسته می‌کند.
تیترهای ضد RBD IgG تا 21 ماه پس از واکسیناسیون با مشخصات ایزوتیپ T-helper 1 (TH1) مشخص باقی ماند. علاوه بر این، سمیت سلولی وابسته به آنتی‌بادی (ADCC) و خواص خنثی‌کننده، همراه با میل پیوندی سرم‌های ایمونولوژیک در برابر سویه اجدادی مربوطه SARS-CoV-2، در طول 21 ماه باقی ماند و به تدریج در طول زمان افزایش یافت. . این یافته ها به شدت حاکی از آن است که حیوانات واکسینه شده با Clec9A-RBD تحت یک بلوغ میل ترکیبی طولانی مدت قرار گرفتند.
فعالیت خنثی‌کننده‌ای که علیه اکثر VOCهای SARS-CoV-2 ایجاد شد، در طول زمان افزایش یافت و در طول بازه زمانی نظارت 21 ماهه باقی ماند، به‌جز نوع SARS-CoV-2 Omicron. به طور جالب توجهی، فعالیت خنثی‌کننده مشاهده شده در برابر ساربکویروس‌های clade-1B متعلق به گونه‌های پانگولین و خفاش در تمام نقاط زمانی آزمایش‌شده قابل تشخیص بود و در طول دوره نظارت 21 ماهه به طور قابل‌توجهی رشد کرد. از سوی دیگر، فعالیت خنثی کننده در برابر sarbecoviruses clade-1A کم بود.
میل پیوندی سرم های ایمونولوژیک Clec9A-RBD علیه VOCs SARS-CoV-2 با گذشت زمان افزایش یافت و تا 21 ماه پس از واکسیناسیون ادامه یافت. به همین ترتیب، فعالیت ADCC گزارش شده علیه VOCs SARS-CoV-2 با گذشت زمان افزایش یافت و 21 ماه پس از واکسیناسیون بالا ماند. علاوه بر این، فعالیت ADCC سرم های ایمونولوژیک در برابر Omicron برابر با فعالیت های ارزیابی شده در برابر سایر VOCs بود.
پاسخ‌های سلول‌های TFH طحال اختصاصی آنتی‌ژن در اوایل هفت روز پس از واکسیناسیون Clec9A-RBD استخراج شد و هنوز شش تا ۱۲ ماه بعد قابل تشخیص بود. این پاسخ ها با اکثر VOC های SARS-CoV-2 مانند Omicron واکنش متقابل داشتند. همچنین، تقریباً دو هفته و هفت روز پس از ایمن سازی، تیم GCها را به ترتیب در غدد لنفاوی بازویی و طحال شناسایی کردند که حتی پس از 6 تا 12 ماه زنده ماندند.
موش‌های تلقیح‌شده با Clec9A-RBD زمانی که سلول‌های طحال با پپتیدهای RBD مجدداً تحریک شدند، سلول‌های ترشح‌کننده اینترفرون (IFN) بسیار بیشتری تولید کردند. این توانایی برتر برای هدف قرار دادن Clec9A برای تحریک پاسخ های ایمونولوژیک سلولی را نشان داد. فراوانی نسبی سلول‌های T بیان‌کننده IFN-Ɣ و اینترلوکین (IL)-5 در حیوانات ایمن‌شده با Clec9A-RBD پاسخ‌های سلولی باطرف TH1 قابل توجهی را در برابر VOCs و سویه مربوط به SARS-CoV-2 نشان داد.
تیترهای ضد RBD IgG با مشخصات ایزوتیپ TH1 قوی در مایعات برونکوآلوئولار لاواژ (BAL) جمع آوری شده دو هفته پس از واکسیناسیون Clec9A-RBD یافت شد. علاوه بر این، نمونه های BAL فعالیت خنثی کننده و همچنین ADCC را در برابر سویه اجدادی مربوطه SARS-CoV-2 نشان دادند. تشخیص سلول های GC B اختصاصی RBD در ریه با تولید آنتی بادی اختصاصی RBD در این بافت سازگار است.
نتیجه
یافته‌های مطالعه نشان داد که هدف قرار دادن SARS-CoV-2 RBD به cDC1s منجر به پاسخ‌های ایمنی قوی و فوق‌العاده طولانی‌مدت پس از یک دوز واکسیناسیون می‌شود. به طور قابل توجهی، این مطالعه شواهدی از ایجاد میل جنسی را در طول زمان نشان داد، که منجر به افزایش اثربخشی و بزرگی پاسخ هومورال علیه طیف وسیعی از اعضای خانواده ساربکو ویروس شد. فناوری هدف‌گیری Clec9A یک پلت‌فرم واکسن انعطاف‌پذیر و plug-and-play را ارائه می‌دهد که می‌تواند به سرعت برای مبارزه با تغییرات سریع در حال توسعه در سراسر جهان به روز شود. محققان بر این باورند که استفاده انسانی از این رویکرد واکسن یک راه عملی و جالب است.
*اطلاعیه مهم
bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان نتیجه‌گیری، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت در نظر گرفته شوند.
*اطلاعیه مهم: bioRxiv گزارش‌های علمی مقدماتی را منتشر می‌کند که توسط همتایان بررسی نمی‌شوند و بنابراین، نباید به‌عنوان اطلاعات قطعی، راهنمای عمل بالینی/رفتار مرتبط با سلامتی در نظر گرفته شوند یا به عنوان اطلاعات ثابت تلقی شوند.